N末端脳性ナトリウム利尿ペプチド前駆体(NT-proBNP)
抗体パラメーター
抗体名 |
抗ヒトN末端脳性ナトリウム利尿ペプチド前駆体抗体(NT-proBNPantibody) |
応用プラットフォーム |
免疫蛍光、コロイド金、化学発光 |
製品品番 |
K23d4 |
K16q7 |
推奨用途 |
マーキング |
コーティング |
抗体源 |
マウスモノクローナル抗体 |
バッファー |
1*PBS |
抗体の精度 |
ProteinA / G精製、精度> 98% |
抗体保管 |
凍結融解を避け、一定量ずつ保管し、-20℃以下で保管してください。 |
抗原パラメータ
抗原名 |
ヒトN末端脳性ナトリウム利尿ペプチド前駆体抗原(NT-proBNP antigen) |
製品説明 |
NT-proBNPタンパク質(9.4kD)をHisタグと融合させ、細胞をin vitroで培養しました。 |
用途 |
品質管理製品、キャリブレーター |
产品货号 |
K2936 |
精度 |
> 90%、R250で染色されたSDS-PAGEゲルから |
バッファー |
1×PBS、pH7.4、凍結乾燥品 |
抗原保管 |
凍結乾燥品:4℃で3年間、溶解後:-20℃で1年間 |
アミノ酸配列 |
MHHHHHHPLG SPGSASDLET SGLQEQRNHL QGKLSELQVE QTSLEPLQES PRPTGVWKSR EVATEGIRGH RKMVLYTLRA PR |
SDS-PAGE |
|
プラットフォーム検出 |
NT-proBNP抗原は、ウシ血清との勾配比較により希釈され、NT-proBNP検出キットで検測した結果、良好な反応直線性、反応勾配、および反応活性があり、使用を満たすことができました。
|
製品データ
コロイド金プラットフォーム
臨床比較分析
金標準抗体として金標準パッドにK23d4をスプレーし、TラインにK16q7をコーティングして、金コロイド試験ストリップに組み立てました。 NT-proBNPコロイド金テストストリップを使用して、30例の血清サンプルを検出しました(Roche、濃度範囲50〜30000 pg / ml)、測定結果を図1に示しますように、R2 > 98%でした。
図1:K23d4-K16q7金コロイドプラットフォームのサンプル一致率
免疫蛍光プラットフォーム
臨床比較分析
K23d4は蛍光標識抗体として使用され、K16q7は免疫蛍光テストストリップを組み立てるためにTラインにコーティングされています。 NT-proBNP免疫蛍光テストストリップを使用して、血清サンプルの30濃度レベル(Roche、濃度範囲50〜30000pg / ml)を検出し、図2、R2に示すように、サンプル濃度を縦軸、信号値を横軸としてグラフを描きます。R2 > 98%。
図2:K23d4-K16q7免疫蛍光プラットフォームのサンプル一致率
正確性
サンプルとして、N末端脳ナトリウム利尿ペプチド前駆体濃度が2000-10000pg / mlと200-800pg / mlの2水準の品質管理製品を使用し、各サンプルについて3回測定を繰り返し、各サンプルの測定結果の平均値を算出しました。 その平均値をMと表記し、式B =(MーT)/ T×100%(Bは相対偏差、Mは測定された濃度の平均、Tはキャリブレーション濃度)に従って相対偏差を計算します。相対偏差は15%以下である必要があります。
ロット番号 |
サンプル (pg/ml) |
測定1 |
測定2 |
測定3 |
平均値 (pg/ml) |
相対偏差 |
標準的な要求 |
ロット1 |
512.24 |
512.51 |
555.53 |
552.85 |
540.30 |
5.48% |
±15% |
3009.51 |
3424.44 |
2785.72 |
2905.79 |
3038.65 |
0.97% |
ロット2 |
512.24 |
448.86 |
445.68 |
471.93 |
455.49 |
-11.08% |
3009.51 |
2712.40 |
2860.29 |
3285.13 |
2952.61 |
-1.89% |
ロット3 |
512.24 |
583.12 |
544.43 |
581.77 |
569.77 |
11.23% |
3009.51 |
2755.03 |
2780.55 |
3244.18 |
2926.59 |
-2.76% |
表1:K23d4-K16q7免疫蛍光プラットフォームの正確性
再現性
200-800 pg / mlと2000-10000 pg / mlの2つのレベルのN末端脳ナトリウム利尿ペプチド前駆体濃度のエンタープライズリファレンス製品をサンプルとして使用し、測定をそれぞれ10回繰り返し、測定値の平均値(
)と標準偏差(s)を計算します。式CV =(S /
)×100%に従って、変動係数(CV)を計算します。結果は15%を超えてはなりません。
|
低値サンプル (512.24pg/ml) |
高値サンプル (3009.51pg/ml) |
測定1 |
511.86 |
3172.17 |
測定2 |
499.60 |
2624.83 |
測定3 |
438.18 |
2814.68 |
測定4 |
517.36 |
3025.60 |
測定5 |
537.41 |
2695.27 |
測定6 |
581.87 |
2769.93 |
測定7 |
569.38 |
3226.73 |
測定8 |
530.46 |
2868.67 |
測定9 |
486.54 |
3233.22 |
測定10 |
561.87 |
2875.08 |
平均値(ng/ml) |
523.45 |
2930.62 |
SD |
42.968 |
221.535 |
CV |
8.21% |
7.56% |
標準的な要求 |
±15% |
表2:K23d4-K16q7免疫蛍光プラットフォームの再現性
NT-proBNPの臨床診断の意義
BNPはB型ナトリウム利尿ペプチドと呼ばれ、脳型ナトリウム利尿ペプチドともよばれています。1988年にブタの脳から最初に単離されました。しかし、すぐにBNPの合成と分泌の主な原因が心室筋であることが発見されました。 BNPは、心室筋細胞でpreproBNPに合成されます。心室筋細胞の伸張中、preproBNPは酵素的にproBNPと切断され、等しい割合で生物学的に活性な32個のアミノ酸BNP(C末端フラグメントを表す)と無生物アクティブな76個のアミノ酸のNー末端フラグメント(NT-proBNP)に切断されます。したがって、BNPとNT-proBNPの血漿レベルは、慢性心不全(CHF)の診断のための客観的なマーカーとして使用できます。
高血漿BNPおよびNT-proBNPは、重要な予後指標を提供できるだけでなく、急性冠症候群や安定狭心症などの冠動脈疾患(CAD)の患者の診断にも使用できます。さらに、BNPとNT-proBNPの両方が腎機能障害の影響を大きく受けており、NT-proBNPは腎機能の悪化の影響をより受けているようです。腎機能障害のある患者では、BNP値とNT-proBNP値が増加し、クレアチニンのクリアランスと負の相関を示しました。腎クリアランスの低下に加えて、左心室肥大、拡張機能障害および収縮機能障害などの付随する左心室の変化、液過剰の発生率が高いと、BNPおよびNT-proBNPの濃度が高くなる可能性があります。これまでの研究では、BNPとNT-proBNPは性別と年齢にも関連していることが示されています。性別の関係は代謝の違いによって引き起こされると考えられていますが、年齢の関係は前臨床の構造的および機能的な心筋の変化を反映している可能性があります。
B型ナトリウム利尿ペプチド(BNP)とNT-proBNPの合成、放出、受容体相互作用の模式図
NT-proBNP基準値
通常値:< 300pg / ml
cut-off値:患者の年齢<50、450pg / ml
患者の年齢50-75、900pg / ml
患者の年齢> 75、1800pg / ml
参考文献
Weber M, Hamm C. Role of B-type natriuretic peptide (BNP) and NT-proBNP in clinical routine.[J]. Heart, 2006, 92(6):843.46(1):118.
Sakai H, Tsutamoto T C, Tanaka T, et al. Direct comparison of brain natriuretic peptide (BNP) and N-terminal pro-BNP secretion and extent of coronary artery stenosis in patients with stable coronary artery disease.[J]. Circulation Journal, 2007, 71(4):499-505.
Bibbins-Domingo K, Ansari M, Schiller N B, et al. Is B-type natriuretic peptide a useful screening test for systolic or diastolic dysfunction in patients with coronary disease? Data from the Heart and Soul Study[J]. American Journal of Medicine, 2004, 116(8):509-516.
Torbjørn Omland, Anita Persson, Leong Ng. N-Terminal Pro-B–Type Natriuretic Peptide and Long-Term Mortality in Acute Coronary Syndromes[J]. Circulation, 2002, 106(23):2913.
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