磷酸化微管相关蛋白（p-tau181）

ELISA平台

抗体亲和力测定

在ELISA平台上利用p-tau181抗原分别检测p-tau181兔单克隆抗体H484c7、R486c5，EC50分别为6.97ng/mL、0.91ng/mL。

图1. A35R抗体（R383e5）ELISA检测结果

图2. A35R抗体（R387c6）ELISA检测结果

时间分辨免疫荧光平台

抗原检测

将p-tau181合成抗原进行梯度稀释（浓度范围0~50000pg/mL），用p-tau181抗体H484c7、R486c5进行检测。

图3. p-tau181抗原检测结果

序号	抗原浓度 (pg/mL)	T/C值
1	0	0.002292977
2	50	0.006239696
3	100	0.008851572
4	200	0.015496176
5	400	0.02941394
6	2000	0.132607819
7	10000	0.560873943
8	50000	1.29634341

表1. p-tau181抗原检测数据

微管相关蛋白（Tau）是20世纪70年代中期通过研究微管形成所需的因素发现的。Tau蛋白促进微管蛋白组装成微管（神经元细胞骨架的主要组成部分，定义正常形态并为神经元提供结构支持）。Tau由17号染色体上的MAPT基因编码，长度超过100kb，包含16个外显子。外显子1是启动子的一部分，被转录但不翻译。外显子1、4、5、7、9、11、12和13是组成型外显子。外显子2、3和10交替剪接并在成人大脑中表现出来。外显子2可以单独出现，但外显子3不会独立于外显子2出现。在中枢神经系统中，外显子2、3和10的选择性剪接产生6种tau亚型，这些亚型在大脑发育过程中差异表达。

Tau与微管蛋白结合受其磷酸化状态的调节，磷酸化是调控tau结构和功能的重要翻译后修饰，主要发生在丝氨酸（Ser）和苏氨酸（Thr）残基和部分酪氨酸（Tyr）残基上。正常成熟脑内tau蛋白磷酸化位点很少，平均只有2、3个，而AD患者脑中Tau蛋白磷酸化位点高达40个以上。成人脑组织中最长的Tau蛋白异构体形式（Tau441）共含有80个Ser和Thr残基，这些残基都是潜在的磷酸化修饰位点，其中Thr²³¹、Ser²⁶²的磷酸化直接影响了tau蛋白与微管的结合。磷酸化状态通常由激酶和磷酸酶对tau分子的协调作用进行调节。在病理条件下，例如AD的情况，tau蛋白的异常磷酸化不仅会降低其微管蛋白结合能力，导致微管解体，还会以神经原纤维缠结（NFT）的形式自我聚合和聚集。