25羟基维生素D（25-OH-D）
产品参数
| 抗体名称 | 抗人维生素D抗体（VD antibody） | ||||
| 应用平台 | 化学发光、免疫荧光、胶体金、胶乳比浊 | ||||
| 产品货号 | K32w5 | K31v3 | |||
| 识别位点 | 识别25OH-VD2&3 | 识别25OH-VD3，与VD2无交叉 | |||
| 推荐用途 | 捕获包被 | 检测标记 | |||
| 缓冲液 | 1*PBS | ||||
| 抗体来源 | 鼠源单抗，细胞体外培养（cell culture）获得 | ||||
| 抗体纯度 | ProteinA/G纯化，纯度>98%。 | ||||
| 抗体储存 | 避免冻融，分装保存，-20℃或更低温度保存 | ||||
产品数据
免疫荧光平台
临床对比分析
以K32w5为包被抗体，K31v3为标记抗体制备免疫荧光试纸条，利用VD免疫荧光试纸条检测罗氏赋值样本30例（浓度范围7-80ng/ml），样本符合率R2>98%
图1：免疫荧光平台样本符合率
准确性
将维生素D质控品稀释成7ng/ml-15ng/ml和45ng/ml-55ng/ml两个浓度水平的样本，对每个样品重复测定3次，根据公式B=（M-T）/T×100%（式中B为相对偏差，M为测量浓度的均值，T为标定浓度）计算相对偏差，相对偏差应不大于15%。
| 样本(ng/ml) | 测定1 | 测定2 | 测定3 | 平均值(ng/ml) | 相对偏差 | 标准要求 | |
| 批次1 | 10.58 | 9.54 | 10.28 | 8.72 | 9.51 | -4.87% | ±15% |
| 50.37 | 47.11 | 45.84 | 43.21 | 45.39 | -9.23% | ||
| 批次2 | 10.58 | 10.42 | 10.74 | 9.59 | 10.25 | 2.50% | |
| 50.37 | 51.09 | 48.34 | 48.63 | 49.35 | -1.29% | ||
| 批次3 | 10.58 | 11.38 | 10.48 | 10.74 | 10.87 | 8.67% | |
| 50.37 | 47.95 | 50.52 | 49.33 | 49.27 | -1.47% |
重复性
用维生素D浓度为5ng/ml-15ng/ml和45ng/ml-55ng/ml的两个水平的质控品为样本，重复测定各10次, 计算测量值的平均值（
）和标准差（s）。按公式CV=（S / ）×100%，计算变异系数(CV)，结果应不大于15%。
）和标准差（s）。按公式CV=（S / ）×100%，计算变异系数(CV)，结果应不大于15%。| 低值样本 （10.58ng/ml） |
高值样本 （50.37ng/ml） |
|
| 测定1 | 12.17 | 57.62 |
| 测定2 | 12.55 | 57.56 |
| 测定3 | 11.87 | 53.81 |
| 测定4 | 10.19 | 58.91 |
| 测定5 | 10.13 | 52.85 |
| 测定6 | 9.55 | 47.14 |
| 测定7 | 11.49 | 49.65 |
| 测定8 | 10.44 | 55.51 |
| 测定9 | 9.95 | 49.95 |
| 测定10 | 11.8 | 47.35 |
| 平均值(ng/ml) | 11.01 | 53.04 |
| SD | 1.07 | 4.36 |
| CV | 9.73% | 8.21% |
| 标准要求 | ±15% | |
胶乳比浊平台
校准曲线
将K32w5、K31v3配对抗体对与胶乳微球偶联制备R2试剂，R1试剂为缓冲液，应用日立7080仪器进行25羟基维生素D（25-OH-D）校准品的定量检测，如图3。
图3：校准曲线
线性范围
以VD胶乳比浊试剂检测6个质控品浓度。如下表和图4所示，线性范围可达到0-200ng/ml。
以VD胶乳比浊试剂检测6个质控品浓度。如下表和图4所示，线性范围可达到0-200ng/ml。
| 理论值 | 测试1 | 测试2 | 均值 |
|---|---|---|---|
| 0.00 | 3.1 | 2.54 | 2.82 |
| 25.00 | 23.22 | 27.02 | 25.12 |
| 50.00 | 55.8 | 52.8 | 54.3 |
| 100.00 | 108.25 | 107.36 | 107.805 |
| 200.00 | 208.76 | 216.74 | 212.75 |
图4：线性范围
临床对比分析
VD胶乳比浊试剂盒测定三甲医院赋值临床血清样本30例，测定结果样本符合率R2>99%。
图5：临床对比分析
试用申请
VD临床诊断意义
维生素D（Vitamin D，VD）是人体健康、生长和发育必不可少的物质，其缺乏或过量与多种疾病密切相关，如骨骼肌肉疾病、呼吸系统疾病、心血管疾病、免疫性疾病、肾脏疾病、神经精神疾病等。
维生素D是一种类固醇激素, 通过调节肠道吸收和肾脏重吸收作用维持机体的钙平衡。维生素D主要包括2种类型：维生素D2（VD2）和维生素D3（VD3），VD2主要通过摄取食物获得（约占VD总量的10%），VD3主要通过日光中的紫外线照射皮肤产生。体内维生素D通过与白蛋白和VD结合蛋白结合后经血液运送至肝脏, 在肝脏分泌的25-羟化酶的参与下, 25号位羟化过程并形成25-（OH）-D。在肾脏中, 25-（OH）-D进一步被1α -羟化酶转化成具有生物活性的1, 25（OH）2D3（1, 25-dihydroxyvitamin D3, 又称骨化三醇）。最后在DBP转运蛋白的载运下，经血液到达小肠、骨等靶器官中与靶器官的核受体（VDRn）或膜受体（VDRm）结合，发挥相应的生物学效应。
25-（OH）-D是机体维生素D的主要储存形式, 占VD总量的95%以上。由于其半衰期长（2 ~ 3周）, 并且不受血钙和甲状旁腺素水平的影响, 因此被公认为是客观评价体内VD含量的最佳指标。
| 体内25羟基维生素D含量（ng/ml） | 临床建议 |
|---|---|
| <10 | 严重缺乏 |
| 10-20 | 缺乏 |
| 20-30 | 不足 |
| 30-100 | 正常 |
参考文献
1.B. Oliveri, A.G. Díaz, M. González Pernas,等. Serum 25OHD levels in adults living in the city of Buenos Aires: Importance of vitamin D supplementation[J]. Bone, 2016, 89:64.
2.Adriana S. Dusso, Alex J. Brown, Eduardo Slatopolsky. Vitamin D[J]. 2005, 289(1):F8-28.
3.Lips, Paul, Graafmans, Wilco C. Vitamin D supplementation and fracture incidence in elderly persons[J]. Annals of Internal Medicine, 1996, 124(4):400-406.
4.向伟, 丁宗一, 郑维. 维生素D及其受体与临床相关疾病的研究[J]. 中华儿科杂志, 2004(7).
