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降钙素原(PCT)

抗体参数

抗体参数
名称 抗人降钙素原抗体(PCT antibody)
应用平台 免疫层析、胶乳比浊、化学发光
货号 K3b8 K58w3 R150e6 R151h2
推荐用途 检测/标记 捕获/包被 检测/捕获 检测/捕获
来源 鼠单抗,体外培养获得
缓冲液 1xPBS,pH 7.4
纯度 ProteinA/G纯化,纯度>98%
储存 -20℃或更低温度,分装保存,避免反复冻融
灵敏度 0.05ng/ml(时间分辨免疫荧光平台)
线性范围 0.05-100ng/ml(时间分辨免疫荧光平台)
抗原参数

抗原参数
名称 重组人降钙素原抗原(PCT antigen)
描述 重组蛋白,C端融合His标签,来源于大肠杆菌体外表达
用途 质控品、校准品
货号 P1103
纯度 >90%,评估来源于R250染色的SDS-PAGE胶。
缓冲液 1xPBS,pH7.4
储存 -80℃分装保存,避免反复冻融
SDS-PAGE

分子量大小为13.7 kDa左右

降钙素原(PCT)的SDS-PAGE和WB分析图

产品数据

产品数据

PCT抗体识别位点

PCT抗体特异识别位点为PCT抗原序列中的降钙素部分,识别位点如下图所示:
PCT抗体识别位点图1 PCT抗体识别位点

胶体金平台

利用K3b8制备胶体金试纸条,利用PCT胶体金试纸条分别对28、15、8、1及0.1 ng/ml浓度的临床血清样本进行检测,T线颜色呈明显梯度变化。
南京欧凯生物的降钙素原(PCT)抗体在胶体金平台验证分析图图2 K3b8胶体金试纸条
临床对比分析
利用K3b8制备胶体金试纸条,使用PCT胶体金试纸条测罗氏赋值血清样本(30例,浓度范围0.05-100ng/ml)进行对比分析,如图3,样本符合率R2>98%。
K58w3-K3b8胶体金平台样本符合率

图3 K3b8胶体金平台样本符合率

免疫荧光平台

临床对比分析
以K3b8、K58w3配对抗体对制备免疫荧光试纸条,利用PCT免疫荧光试纸条检测罗氏赋值血清样本(30例,浓度范围0.05~100ng/ml)样本符合率R2>98%。
K58w3-K3b8免疫荧光平台样本符合率

图4 K58w3-K3b8免疫荧光平台样本符合率

准确性
将降钙素原浓度为5~50ng/ml和0.4~4ng/ml两水平的质控品当做样本,用K58w3和K3b8抗体对每个样品重复测定3次,计算每个样品测定结果的均值,记为M,并根据公式B=(M-T)/T×100%(B为相对偏差;M为测量浓度均值;T为标定浓度)计算相对偏差;相对偏差均小于15%。
表1 PCT抗体免疫荧光平台准确性

样本
(ng/ml)
测定1
(ng/ml)
测定2
(ng/ml)
测定3
(ng/ml)
平均值
(ng/ml)
相对偏差 标准要求
批次1 1.02 1.15 1.11 0.96 1.07 4.90% ±15%
10.25 9.92 9.93 9.44 9.76 -4.78%
批次2 1.02 0.96 1.06 0.99 1.00 -1.96%
10.25 8.94 11.69 8.80 9.81 -4.29%
批次3 1.02 0.91 1.16 0.97 1.01 -0.98%
10.25 11.22 10.19 10.88 10.76 4.98%
重复性
将降钙素原浓度为5~50ng/ml和0.4~4ng/ml两个水平的质控品当做样本,用K58w3和K3b8抗体对每个样品重复测定10次,计算测量值的平均值(平均数)和标准差(s)。按公式CV=(S /平均数)×100%,计算变异系数(CV),结果均小于15%。

表2 PCT抗体免疫荧光平台重复性

低值样本
(1.02ng/ml)
高值样本
(10.25ng/ml)
测定1(ng/ml) 1.00 11.15
测定2(ng/ml) 1.02 8.86
测定3(ng/ml) 0.87 11.67
测定4(ng/ml) 1.08 10.46
测定5(ng/ml) 1.03 9.97
测定6(ng/ml) 1.09 11.40
测定7(ng/ml) 0.98 11.29
测定8(ng/ml) 1.01 10.36
测定9(ng/ml) 0.98 11.65
测定10(ng/ml) 1.05 10.49
平均值(ng/ml) 1.01 10.73
SD 0.062 0.883
CV 6.14% 8.23%
标准要求 ±15%
试用申请

试用申请
临床意义

PCT临床诊断意义
炎症标志物—PCT
降钙素原(PCT)是激素降钙素(CT)的前体肽。在CT-mRNA翻译后,PCT被酶解成终产物为32个氨基酸的成熟CT。正常人的血清中的PCT含量极低,在被微生物感染后,CALC-I基因被诱导表达,促进PCT的分泌,8小时达到峰值。目前,PCT已被认为是全身性炎症反应综合征的标志物,可以指导治疗,减少抗生素的使用,诊断败血症,改善长期结果。
指导抗生素使用
世界卫生组织研究表明,每100例呼吸道感染中只有20例需要抗生素治疗。然而,采用传统的诊断细菌感染培养方法经常会有延迟。因此,一个专门针对细菌感染的标志物是最有帮助的。研究发现,PCT可以作为区分细菌感染与非感染的炎症原因以及区分细菌感染与病毒感染的重要指标。而且,PCT水平的动态具有重要的预后意义。
败血症诊断
危重病人往往表现为全身炎症反应综合征(SIRS)。当SIRS存在并且感染被证实或怀疑时,使用术语败血症。在严重感染中,大多数促炎症细胞因子(如TNF-α、IL-1b或IL-6)仅短暂地或间歇地增加。而在败血症中,PCT水平增加几倍直至数千倍,并且在入院时这种增加通常与病情的严重程度和随后的死亡率相关。各种研究和综述显示PCT与诊断败血症的其他参数相比具有更高的诊断准确性。
PCT参考值
<0.05 ng/ml 正常值
<0.5ng/ml 无或轻度全身性炎症
0.5-2ng/ml 中度全身炎症
2-10ng/ml 疑似脓毒症患者
≥10ng/ml 严重细菌性脓毒症

参考文献

[1] Becker K L, Nylén E S, White J C, et al. Clinical review 167: Procalcitonin and the calcitonin gene family of peptides in inflammation, infection, and sepsis: a journey from calcitonin back to its precursors.[J]. Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism, 2004, 89(4): 1512.
[2] Weglohner W R D, Struck J S C, Morgenthaler N, et al. Isolation and characterization of serum procalcitonin from patients with sepsis.[J]. Peptides, 2001, 22(12): 2099-103.
[3] Müller B, White J C, Nylén E S, et al. Ubiquitous expression of the calcitonin-i gene in multiple tissues in response to sepsis[J]. Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism, 2001, 86(1): 396.
[4] Levin A S. Overcoming Antimicrobial Resistance[J]. Brazilian Journal of Infectious Diseases, 2008, 12: 10-21.

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