脑利钠肽(BNP)

产品参数

抗体参数

名称 脑利钠肽抗体(BNP antibody)
货号 K136m1 R195e5
类型 单克隆抗体
反应物种
应用平台
推荐配对
化学发光、免疫层析
R195e5(捕获)-K136m1(检测)
缓冲液 1xPBS,pH 7.4
纯度 Protein A/G纯化,纯度>95%
储存 -20℃或更低温度,分装保存,避免反复冻融
产品数据

产品数据

化学发光平台(ALP)

1.雅培样本符合率

用BNP抗体(R195e5、K136m1)制成的化学发光试剂,检测55例雅培赋值样本,样本符合率(R2)为0.9988。

编号 样本浓度
(pg/mL)
RLU
1 <10 8355
2 <10 9563
3 15.3 21366
54 3750 5689869
55 >4000 6971339

表1. BNP临床对比分析数据(雅培赋值)

BNP临床对比分析(雅培赋值)

图1. BNP临床对比分析(雅培赋值)

2.最低检测限

用BNP抗体(R195e5、K136m1)制成的化学发光试剂,对零浓度稀释液重复测定20次,计算最低检测限。

名称 浓度(pg/mL) RLU平均值 线性方程
校准品S1 0 4833 y=274x+4833
校准品S2 5 6203
20次重复测定零浓度稀释液RLU值
4766 4836 5122 4879
4933 4988 4820 4566
4803 5103 4766 4968
5108 5269 4822 4875
4998 5169 4923 4888
RLU均值 4930
SD 165.8
平均值+2SD 5262
最低检测限(pg/mL) 1.565

表2. BNP化学发光试剂最低检测限

3.线性

将浓度为5010pg/mL的雅培赋值高浓度样本,用样本稀释液稀释为40%、20%、10%、2%、0.2%和0.1%六个浓度。用BNP抗体(R195e5、K136m1)制成的化学发光试剂对高浓度样本及六个稀释样本进行检测,计算相关性。

百分比 浓度(pg/mL) RLU 绝对偏差 相对偏差
100% 5010 7616661 / -0.10%
40% 2021 3045882 / 0.70%
20% 1002 1487627 / -0.10%
10% 492.5 708500 / -1.80%
2% 101.3 110277 / 0.80%
0.2% 10.18 12850 -0.06 /
0.1% 4.93 6114 -0.07 /
相关性:0.99999

表3. BNP化学发光试剂线性

4.重复性

利用同一批BNP抗体(R195e5、K136m1)制成的化学发光试剂对浓度为50.28pg/mL和1019pg/mL的雅培赋值样本各重复检测10次,其测量浓度变异系数(CV)均小于2.5%。

低值样本
编号 RLU 浓度(pg/mL)
1 65235 51.01
2 63682 49.80
3 65222 51.00
4 64580 50.50
5 65607 51.30
6 66890 52.30
7 66338 51.87
8 62438 48.83
9 63502 49.66
10 67082 52.45
平均值 / 50.87
标准差 / 1.187
CV 2.3%

表4. BNP化学发光试剂重复性(低值)

高值样本
编号 RLU 浓度(pg/mL)
1 1492215 1003
2 1462854 985.8
3 1507507 1015
4 1483346 999.2
5 1571733 1048
6 1572866 1048
7 1565617 1053
8 1516682 1021
9 1505978 1014
10 1482275 998.5
平均值 / 1018.55
标准差 / 23.691
CV 2.33%

表5. BNP化学发光试剂重复性(高值)

5.准确度

将浓度为1001pg/mL的雅培赋值高浓度样本,按照1:9的体积比加入到浓度为49.23pg/mL的低浓度血清中,配制成浓度为144.41pg/mL的回收样品,用BNP抗体(R195e5、K136m1)制成的化学发光试剂进行检测,计算回收率。

待测物 测定浓度(pg/mL) RLU 浓度平均值(pg/mL)
高浓度样本 1002 1487627 1004.50
999.5 1483804
1012 1502919
低浓度血清 50.16 64144 49.57
49.88 63785
48.68 62245
回收样品 144.2 184797 140.77
137.8 176586
140.3 179794
回收率 95.72%

表6. BNP化学发光试剂回收率

6.热稳定性

将BNP抗体(R195e5、K136m1)制成的化学发光试剂组份分别放置于37℃培养箱和4℃冰箱中加速7天,分别测试高、低值质控品,比较其偏差。

低值质控品
编号 RLU 浓度(pg/mL)
4℃7天 37℃7天 4℃7天 37℃7天
1 62501 60962 48.88 47.68
2 65516 62219 51.23 48.66
3 63798 60936 49.89 47.66
偏差 4.2%

表7. BNP化学发光试剂热稳定性(低值)

高值质控品
编号 RLU 浓度(pg/mL)
4℃7天 37℃7天 4℃7天 37℃7天
1 1492215 1451232 1005 978.2
2 1502919 1436552 1012 968.6
3 1487627 1439458 1002 970.5
偏差 3.6%

表8. BNP化学发光试剂热稳定性(高值)

试用申请

试用申请

BNP临床诊断意义

BNP临床诊断意义

脑钠肽(BNP)又称B型利钠肽,由32个氨基酸组成,是哺乳动物心肌细胞的主要利钠肽之一。BNP的最初翻译产物为前BNP原(preproBNP),含134个氨基酸;切除信号肽后形成含108个氨基酸的BNP前体(proBNP),并储存于心肌分泌颗粒中。当心肌细胞在跨壁应激增加时,proBNP释放并裂解成有活性的BNP和无活性的N端脑钠肽前体(NT-proBNP)。BNP最终与钠肽C受体(NPR-C)结合,继而被胞吞和溶酶体降解。

脑钠肽(BNP)与心功能不全、心肌缺血

BNP浓度在心功能紊乱时,随着心室压力的增大而显著升高;心衰患者接受治疗12小时之后,BNP浓度显著下降。 因此BNP可作为心力衰竭和心肌梗死预后的一个独立预测因子,动态监测心衰患者的治疗效果,是急诊室心衰诊断的“金标准”。

BNP参考值(依据2008ESC心衰指南):

BNP< 100pg/ml 基本排除心衰,其阴性预测准确性高达97.7%
100pg/ml< BNP< 400pg/ml 不确诊
BNP >400pg/ml 心衰可能

脑钠肽(BNP)与急性缺血损伤

心肌缺血可触发许多内源性细胞保护因子如BNP的释放。在急性心肌梗死的大鼠心脏模型中,外源性给予BNP,可以以浓度依赖性的方式限制梗死面积,这是一种独立于肽的内分泌的细胞保护作用。BNP的这种急性保护作用机制似乎与第二信使三磷酸鸟苷转化为环磷酸鸟苷(cGMP)的增加有关,并涉及线粒体ATP敏感性钾(KATP)通道的开放。许多内源性保护介质被认为是作用于G蛋白偶联受体,通过线粒体KATP通道开放产生抗缺血作用的。在一些心脏疾病状态下, G蛋白偶联受体反应可能下调;此时BNP采用了新的分子信号途径,BNP/NPR-A诱导cGMP升高并激活cGMP依赖性蛋白激酶-I(cGK-I),通过cGMP/cGK-I途径开放KATP通道。因此BNP/NPR-A信号通路可以作为一种非常有效的储备救助途径,保护和挽救组织。

脑钠肽(BNP)与心肌梗死后重塑

心肌梗死后心肌BNP表达的持续升高,影响组织重塑,这个可能与BNP抑制成纤维细胞活性和心肌细胞肥大作用有关。研究表明,梗死后BNP和心钠素(ANP)对心肌成纤维细胞有明显作用。这两种肽都抑制体外缺氧时心脏成纤维细胞的胶原合成,并抑制血管紧张素Ⅱ刺激时的成纤维细胞增殖。在bnp基因缺失的小鼠中发现了多灶性心脏纤维化。NPR-A-/-敲除小鼠也会出现高血压,并伴有过度表达心肌肥大和纤维化。

综上所述,脑钠肽(BNP)是一种多效性肽,其对无症状左室功能不全、心力衰竭、急性缺血和心肌梗死等心脏疾病具有重要的临床诊断和治疗意义。

参考文献

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[6] S, P, D’Souza, et al. B Type natriuretic peptide: a good omen in myocardial ischaemia?[J]. Heart Official Journal of the British Cardiac Society, 2003:707-709.

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