实时荧光定量PCR预混液(2×SYBR Green Mix)

产品参数

产品参数

产品名称 组成成分 规格 货号
2×SYBR Green
qPCR预混液
热启动Taq酶、SYBR GreenⅠ、dNTP Mix、Mg2+、Enhancer、特殊稳定剂和优化的缓冲液 1 ml M107R1
5 ml

产品特征

灵敏度高:能对低拷贝或多样性模板进行定量。

特异性强:采用热启动酶的激活机制,抑制非特异性扩增 。

重复性好:扩增曲线重合度高,受干扰影响少。

扩增效率高:扩增曲线Ct值低,起峰快,效率高。

产品应用

1)基于荧光定量PCR检测;

2)核酸扩增和基因表达;

3)自动化和高通量的定量基因分型研究;

4)基因组学相关应用。

使用方法

(1)qPCR反应体系配制

试剂 50μl 20 μl
SYBR Green预混液 25 μl 10 μl
Forward Primer(10 μM) 1 μl 0.4 μl
Reverse Primer(10 μM) 1 μl 0.4 μl
模板DNA X μl X μl
无菌超纯水 Up to 50 μl Up to 20 μl

(2)PCR 反应条件

95℃ 15min 预变性
95℃ 10 Sec 循环反应(40 cycles)
55~60℃ 20 Sec
72℃ 20 Sec
95℃ 15 Sec 融解曲线
60℃ 60 Sec
95℃ 15 Sec

(3)qPCR反应有效性确认标准

1)线性关系以及扩增效率确认:
标准曲线相关系数(R2)>0.98
标准曲线斜率介于 -3~-3.5之间
PCR扩增效率(E)介于0.9~1.2之间。

2)重复性确认:
重复管之间的STD<0.2

注:详细操作流程参照说明书。

产品数据

案例介绍

(1)扩增曲线

欧凯生物的实时荧光定量PCR试剂盒的扩增曲线比对图

图1. 欧凯生物,国产试剂,进口试剂以及三者比较扩增曲线对比图。由图1可以看出,在同样的扩增条件下,欧凯生物的SYBR Green Mix起峰快,Ct值低,可重复性好,扩增效率高。

(2)熔解曲线

欧凯生物的实时荧光定量PCR试剂盒的熔解曲线比对图

图2. 欧凯生物,国产试剂,进口试剂以及三者比较熔解曲线图。由图2可以看出,在同样的条件下,欧凯生物的熔解曲线单一峰,具有特异性强、重复性好、灵敏度高。

(3)标准曲线

欧凯生物的实时荧光定量PCR试剂盒的标准曲线比对图

图3.欧凯生物,国产试剂,进口试剂对比图。欧凯生物的SYBR Green Mix使定量PCR可以在宽广的定量范围内获得良好的线性关系。

原始数据如下:

欧凯生物的实时荧光定量PCR试剂盒检测的原始数据

产品数据

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