RNase抑制剂(Murine RNase Inhibitor)

产品参数

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名称 规格 货号
RNase抑制剂
(Murine RNase Inhibitor)
50μL M111U1
100μL
产品参数

产品介绍

Murine RNase Inhibitor是在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,它以1:1的非共价结合方式特异性抑制RNase(A、B和C),从而保护RNA完整度不被降解。本产品可与各种商业化Reverse Transcriptase和DNA Polymerase兼容,可用于后续RT-PCR试验等。Murine RNase Inhibitor不含人源蛋白中两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,相比人源RNase inhibitor具有更高的抗氧化活性,更加适合于高DTT敏感性试验(如qPCR)。
活性定义

抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。 RNase A的活性是通过抑制Cyclic 2', 3'-CMP水解生成3'-CMP定量确定的。

产品应用

1. RT-PCR。
2. 在体外转录/翻译(如病毒体外复制体系)中对RNA进行保护。
3. RNA完整性保护试验。

运输与保存

-20°C保存,冷冻运输。

注意事项

1. 本产品的活性温度在42℃表现最大活性,50℃以上失活。
2. 本产品抑制RNase活性的pH值范围较广,在pH 7.0-8.0时表现最大活性。
3. 本产品在使用前避免剧烈震荡,轻弹混匀较好。
4. 本产品不抑制RNase H及RNase T1活性。

试验操作

  • 在RNase-free离心管中配制以下混合液;
    组分 体积(μL)
    RNase-free ddH2O Up to 20
    5×RT Buffer 4
    Oligo(dT)18(20 µM) 1
    dNTP Mix(10 mM each) 1
    Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 1
    Reverse Transcriptase(200 U/µL) 1
    模板RNA 10pg-2.5μg
  • 轻轻混匀,瞬时离心;
  • 42℃ 45 min,70℃ 15 min;
  • 产物于-20℃保存。
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